GB 31660.7—2019 2019 -09-06发布 2020 -04-01实施 食品安全国家标准 猪组织和尿液中赛庚啶及可乐定 残留量的 测定 液相色谱 -串联质谱法 National food safety standard - Determination of cyproheptadine and clonidine residues in pig tissues and urine by liquid chromatography -tandem mass spectrometry method 发布 GB31660.7—2019 I 前 言 本标准系首次发布。GB31660.7—2019 1 食品安全国家标准 猪组织和尿液中赛庚啶及可乐定残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 1 范围 本标准规定了 猪组织和尿液中赛庚啶和可乐定的制样和 液相色谱 -串联质谱 测定方法 。 本标准适用于猪 肌肉、肝脏、肾脏 及尿液中赛庚啶和可乐定 残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅 注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 组织试样中残留的 赛庚啶或可乐定 ，用酸性乙腈 提取，液相色谱 -串联质谱 测定，内标 法定量。 尿液中残留的赛庚啶或可乐定，经酸化、固相萃取柱净化，液相色谱 -串联质谱测 定，内标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯， 水为符合 GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 甲醇（CH 3OH）：色谱纯。 4.1.2 乙腈（CH 3CN）：色谱纯。 4.1.3 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 4.1.4 氨水（NH 4OH）。 4.1.5 盐酸（HCl）。 4.1.6 硫酸镁（Mg 2SO4）。 4.1.7 氯化钠（NaCl）。 4.2 溶液配制 4.2.1 1 mol/L盐酸溶液：取盐酸 90 mL，用水稀释至 1000 mL。 GB31660.7—2019 2 4.2.2 1%甲酸乙腈溶液：取甲酸 5 mL，用乙腈稀释至 500 mL。 4.2.3 0.1％甲酸溶液：取甲酸 1 mL，用水稀释至1000 mL。 4.2.4 乙腈 -0.1％甲酸溶液：取 0.1%甲酸溶液 80 mL，加乙腈至100 mL，混匀。 4.2.5 5％氨水甲醇溶液：取氨水 5 mL，用甲醇稀释至100mL。 4.3 标准品 4.3.1 盐酸赛庚啶 （Cyproheptadine hydrochloride,C 21H21N·HCl,CAS 号:969-33-5）、盐酸可乐 定（Clonidine hydrochloride,C 9H10Cl3N3,CAS号:4205 -91-8）：含量均≥98.0%。 4.3.2 内标：盐酸二苯拉林 （Diphenylpyraline ,C9H13NO·HCl,CAS 号:61-76-7）、盐酸可乐定 -D4（Clonidine -D4 hydrochloride,C 9H6D4Cl3N3）：含量均≥98%。 4.4 标准溶液制备 4.4.1 标准储备液（1 mg/mL）：取盐酸 赛庚啶、盐酸可乐定、盐酸二苯拉林和 盐酸可乐定 -D4标准品各约 10mg，精密称定，分别于 10 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制 成浓度分别为 1 mg/mL 的盐酸赛庚啶、盐酸可乐定、盐酸二苯拉林和 盐酸可乐定 -D4标准贮 备液。4℃下保存，有效期 6个月。 4.4.2 混合标准 工作液（10 μg/mL）：分别精密量取 盐酸赛庚啶和盐酸可乐定 标准贮备液各 1 mL，于 100 mL量瓶中，用甲醇溶解并 稀释至刻度 ，制成浓度为 10 μg/mL的盐酸赛庚啶 和盐酸可乐定标准 工作液。4℃下保存，有效期 3个月。 4.4.3 混合内标 中间液：分别 精密量取 盐酸二苯拉林 储备液100 μL、盐酸可乐定 -D4储备液 1 mL，于 100 mL量瓶中，用甲醇 稀释至刻度 ，配制成 含盐酸二苯拉林 1μg/mL和盐酸可乐 定-D4 10 μg/mL的混合内标 中间液。于4℃下保存，有效期 1个月。 4.4.4 混合内标工作液： 精密量取 混合内标中间液1 mL，于 10 mL量瓶中，用乙腈 -0.1％ 甲酸溶液 稀释至刻度 ，配制成 含盐酸二苯拉林 100 ng/mL和盐酸可乐定 -D4 1 μg/mL的混合 内标工作液，临用现配。 4.4.5 标准曲线 制备：精密量取 混合标准 工作液和混合内标工作液 适量，用乙腈 -0.1％甲酸 溶液稀释成赛庚啶和可乐定 浓度为 0.5、1、10、50和100 μg/L系列混合标准工作液，其中 含盐酸二苯拉林的浓度和盐酸可乐定 -D4的浓度分别为 5 μg/L和50 μg/L，临用现配。 4.5 材料 4.5.1 C18粉：碳载量 25.0-28.0。 4.5.2 混合型强阳离子固相萃取柱， 60 mg/3 mL 或相当者。