中华人民共和国国家标准 GB5009.121—2016 食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.121—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.121—2003《食品中脱氢乙酸的测定》。 本标准与GB/T5009.121—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定”; ———增加液相色谱法; ———液相色谱法采用GB/T23377—2009的方法; ———增加试样分类; ———改进气相色谱法中样品的制备和提取方法; ———修改气相色谱法的色谱条件。GB5009.121—2016 1 食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定 1 范围 本标准规定了果蔬汁、果蔬浆、酱菜、发酵豆制品、黄油、面包、糕点、烘烤食品馅料、复合调味料、预 制肉制品及熟肉制品中脱氢乙酸含量的测定方法。 本标准适用于果蔬汁、果蔬浆、酱菜、发酵豆制品、黄油、面包、糕点、烘烤食品馅料、复合调味料、预 制肉制品及熟肉制品中脱氢乙酸含量的测定,其他食品可参考执行。 第一法 气相色谱法 2 原理 固体(半固体)样品,沉降蛋白、经脱脂酸化后,用乙酸乙酯提取;果蔬汁、果蔬浆样品经酸化后,用乙 酸乙酯提取;用配氢火焰离子化检测器的气相色谱仪分离测定,以色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。 3.1 试剂 3.1.1 乙酸乙酯(C4H8O2):色谱纯。 3.1.2 正己烷(C6H14):色谱纯。 3.1.3 盐酸(HCl)。 3.1.4 硫酸锌(ZnSO4·7H2O)。 3.1.5 氢氧化钠(NaOH)。 3.2 试剂配制 3.2.1 盐酸溶液(1+1,体积比):量取50mL盐酸加入到50mL水中。 3.2.2 硫酸锌溶液(120g/L):称取12g硫酸锌,溶于水并稀释至100mL。 3.2.3 氢氧化钠溶液(20g/L):称取2g氢氧化钠,溶于水并稀释至100mL。 3.3 标准品 脱氢乙酸(DehydroaceticAcid,C8H8O4,CAS:520-45-6)标准品:纯度≥99.5%。 3.4 标准溶液的制备 3.4.1 脱氢乙酸标准贮备液(1.0mg/mL):准确称取脱氢乙酸标准品0.1000g(精确至0.0001g)于 100mL容量瓶中,用乙酸乙酯溶解并定容。4℃保存,有效期为3个月。GB5009.121—2016 2 3.4.2 脱氢乙酸标准工作液:分别精确吸取脱氢乙酸标准贮备液0.01mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、 2.0mL于10mL容量瓶中,用乙酸乙酯稀释并定容,配制成浓度为1.00μg/mL、10.0μg/mL、50.0μg/mL、 100μg/mL、200μg/mL标准工作液。4℃保存,有效期为1个月。 4 仪器和设备 4.1 气相色谱仪,配氢火焰离子化检测器。 4.2 天平:感量为0.1mg和1mg。 4.3 离心机:转速≥4000r/min。 4.4 超声波清洗器:功率35kW。 4.5 粉碎机。 4.6 不锈钢高速均质器。 4.7 pH计。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 果蔬汁、果蔬浆:称取样品2g~5g(精确至0.001g),置于50mL离心管中,加10mL水振摇 1min,加1mL盐酸溶液(3.2.1)酸化后,准确加入5.0mL乙酸乙酯,振摇提取2min,静置分层,取上清 液供气相色谱测定。 5.1.2 酱菜、发酵豆制品:样品用不锈钢高速均质器均质。称取样品2g~5g(精确至0.001g),置于 50mL离心管中,加入约15mL水、2.5mL硫酸锌溶液(3.2.2),用氢氧化钠溶液(3.2.3)调pH至7.5, 超声提取15min,转移至25mL容量瓶中,加水定容。样液移入离心管中,4000r/min离心10min。 取10mL上清液,加1mL盐酸溶液(3.2.1)酸化后,准确加入5.0mL乙酸乙酯,振摇2min,静置分层, 取上清液供气相色谱测定。 5.1.3 面包、糕点、烘烤食品馅料、复合调味料、预制肉制品及熟肉制品:样品用粉碎机粉碎或不锈钢高 速均质器均质。称取样品2g~5g(精确至0.001g),置于50mL离心管中,加入约15mL水、2.5mL 硫酸锌溶液(3.2.2),用氢氧化钠溶液(3.2.3)调pH至7.5,超声提取15min,转移至25mL容量瓶中,加 水定容。样液移入分液漏斗中,加入5mL正己烷,振摇1min,静置分层,取下层水相置于离心管中, 4000r/min离心10min。取10mL上清液,加1mL盐酸溶液(3.2.1)酸化后,准确加入5.0mL乙酸 乙酯,振摇2min,静置分层,取上清液供气相色谱测定。 5.1.4 黄油:称取样品2g~5g(精确至0.001g),置于50mL离心管中,加入约15mL水、2.5mL硫酸 锌溶液(3.2.2),用氢氧化钠溶液(3.2.3)调pH至7.5,超声提取15min,转移至25mL容量瓶中,加水定 容。样液移入分液漏斗中,加入5mL正己烷,振摇1min,静置分层,取下层水相置于离心管中, 4000r/min离心10min。取10mL上清液,加1mL盐酸溶液(3.2.1)酸化后,准确加入5.0mL乙酸 乙酯,振摇2min,静置分层,取上清液供气相色谱测定。 5.2 仪器参考条件 5.2.1 毛细管柱:极性毛细柱(化学键和聚乙二醇固定相,30m×0.32mm×0.25μm),或相当者。 5.2.2 柱温升温程序:初温150℃,以10℃/min速率升至210℃,20℃/min速率升至240℃,保持 2min。 5.2.3 进样口温度:240℃。 5.2.4 检测器温度:300℃。