中华人民共和国国家标准 GB5009.263—2016 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.263—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T22253—2008《食品中阿力甜的测定》、GB/T22254—2008《食品中阿斯巴甜的测 定》。 本标准与GB/T22253—2008和GB/T22254—2008相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定”; ———增加了适用范围。GB5009.263—2016 1 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定 1 范围 本标准规定了食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定方法。 本标准适用于食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定。 2 原理 根据阿斯巴甜和阿力甜易溶于水、甲醇和乙醇等极性溶剂而不溶于脂溶性溶剂特点,蔬菜及其制 品、水果及其制品、食用菌和藻类、谷物及其制品、焙烤食品、膨化食品和果冻试样用甲醇水溶液在超声 波振荡下提取;浓缩果汁、碳酸饮料、固体饮料类、餐桌调味料和除胶基糖果以外的其他糖果试样用水提 取;乳制品、含乳饮料类和冷冻饮品试样用乙醇沉淀蛋白后用乙醇水溶液提取;胶基糖果用正己烷溶解 胶基并用水提取;脂肪类乳化制品、可可制品、巧克力及巧克力制品、坚果与籽类、水产及其制品、蛋制品 用水提取,然后用正己烷除去脂类成分。各提取液在液相色谱C18反相柱上进行分离,在波长200nm 处检测,以色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的实验室一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.2 乙醇(CH3CH2OH):优级纯。 3.2 标准品 3.2.1 阿力甜标准品(C14H25N3O4S,CAS号:80863-62-3):纯度≥99%。 3.2.2 阿斯巴甜标准品(C14H18N2O5,CAS号:22839-47-0):纯度≥99%。 3.3 标准溶液配制 3.3.1 阿斯巴甜和阿力甜的标准储备液(0.5mg/mL):各称取0.025g(精确至0.0001g)阿斯巴甜和阿 力甜,用水溶解并转移至50mL容量瓶中并定容至刻度,置于4℃左右的冰箱保存,有效期为90d。 3.3.2 阿斯巴甜和阿力甜混合标准工作液系列的制备:将阿斯巴甜和阿力甜标准储备液用水逐级稀释 成混合标准系列,阿斯巴甜和阿力甜的浓度均分别为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、 5.0μg/mL的标准使用溶液系列。置于4℃左右的冰箱保存,有效期为30d。 4 仪器和设备 4.1 液相色谱仪:配有二极管阵列检测器或紫外检测器。GB5009.263—2016 2 4.2 超声波震荡器。 4.3 天平:感量为1mg和0.1mg。 4.4 离心机:转速≥4000r/min。 5 分析步骤 5.1 试样制备及前处理 5.1.1 碳酸饮料、浓缩果汁、固体饮料、餐桌调味料和除胶基糖果以外的其他糖果 称取约5g(精确到0.001g)碳酸饮料试样于50mL烧杯中,在50℃水浴上除去二氧化碳,然后将 试样全部转入25mL容量瓶中,备用;称取约2g浓缩果汁试样(精确到0.001g)于25mL容量瓶中,备 用;称取约1g的固体饮料或餐桌调味料或绞碎的糖果试样(精确到0.001g)于50mL烧杯中,加 10mL水后超声波震荡提取20min,将提取液移入25mL容量瓶中,烧杯中再加入10mL水超声波震 荡提取10min,提取液移入同一25mL容量瓶,备用。将上述容量瓶的液体用水定容,混匀, 4000r/min离心5min,上清液经0.45μm水系滤膜过滤后用于色谱分析。 5.1.2 乳制品、含乳饮料和冷冻饮品 对于含有固态果肉的液态乳制品需要用食品加工机进行匀浆,对于干酪等固态乳制品,需用食品加 工机按试样与水的质量比1:4进行匀浆。 分别称取约5g液态乳制品、含乳饮料、冷冻饮品、固态乳制品匀浆试样(精确到0.001g)于50mL 离心管,加入10mL乙醇,盖上盖子;对于含乳饮料和冷冻饮品试样,首先轻轻上下颠倒离心管5次(不 能振摇),对于乳制品,先将离心管涡旋混匀10s,然后静置1min,4000r/min离心5min,上清液滤入 25mL容量瓶,沉淀用8mL乙醇-水(2+1)洗涤,离心后上清液转移入同一25mL容量瓶,用乙醇-水 (2+1)定容,经0.45μm有机系滤膜过滤后用于色谱分析。 5.1.3 果冻 对于可吸果冻和透明果冻,用玻棒搅匀,含有水果果肉的果冻需要用食品加工机进行匀浆。 称取约5g(精确到0.001g)制备均匀的果冻试样于50mL的比色管中,加入25mL80%的甲醇水 溶液,在70℃的水浴上加热10min,取出比色管,趁热将提取液转入50mL容量瓶,再用15mL80% 的甲醇水溶液分两次清洗比色管,并每次振摇约10s,并转入同一个50mL的容量瓶,冷却至室温,用 80%的甲醇水溶液定容到刻度,混匀,4000r/min离心5min,将上清液经0.45μm有机系滤膜过滤后 用于色谱分析。 5.1.4 蔬菜及其制品、水果及其制品、食用菌和藻类 水果及其制品试样如有果核首先需要去掉果核。 对于较干较硬的试样,用食品加工机按试样与水的质量比为1∶4进行匀浆,称取约5g(精确到 0.001g)匀浆试样于25mL的离心管中,加入10mL70%的甲醇水溶液,摇匀,超声10min, 4000r/min离心5min,上清液转入25mL容量瓶,再加8mL50%的甲醇水溶液重复操作一次,上清 液转入同一个25mL容量瓶,最后用50%的甲醇水溶液定容,经0.45μm有机系滤膜过滤后用于色谱 分析。 对于含糖多的、较粘的、较软的试样,用食品加工机按试样与水的质量比为1∶2进行匀浆,称取约 3g(精确到0.001g)匀浆试样于25mL的离心管中;对于其他试样,用食品加工机按试样与水的质量比 1∶1进行匀浆,称取约2g(精确到0.001g)匀浆试样于25mL的离心管中;然后向离心管加入10mL