中华人民共和国国家标准 GB5009.9—2016 食品安全国家标准 食品中淀粉的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.9—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.9—2008《食品中淀粉的测定》、GB/T5514—2008《粮油检验 粮食、油料 中淀粉含量测定》、GB/T9695.14—2008《肉制品 淀粉含量测定》。 本标准与GB/T5009.9—2008相比,主要变化如下: ———增加了低含量样品测定操作; ———增加了试剂空白测定; ———修改了第一法中的计算公式; ———增加了第三法 肉制品中淀粉含量测定。GB5009.9—2016 1 食品安全国家标准 食品中淀粉的测定 1 范围 本标准规定了食品中淀粉的测定方法。 本标准第一法和第二法适用于食品(肉制品除外)中淀粉的测定;第三法适用于肉制品中淀粉的测 定,但不适用于同时含有经水解也能产生还原糖的其他添加物的淀粉测定。 第一法 酶水解法 2 原理 试样经去除脂肪及可溶性糖后,淀粉用淀粉酶水解成小分子糖,再用盐酸水解成单糖,最后按还原 糖测定,并折算成淀粉含量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。 3.1 试剂 3.1.1 碘(I2)。 3.1.2 碘化钾(KI)。 3.1.3 高峰氏淀粉酶:酶活力≥1.6U/mg。 3.1.4 无水乙醇(C2H5OH)或95%乙醇。 3.1.5 石油醚:沸程为60℃~90℃。 3.1.6 乙醚(C4H10O)。 3.1.7 甲苯(C7H8)。 3.1.8 三氯甲烷(CHCl3)。 3.1.9 盐酸(HCl)。 3.1.10 氢氧化钠(NaOH)。 3.1.11 硫酸铜(CuSO4·5H2O)。 3.1.12 酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)。 3.1.13 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。 3.1.14 亚甲蓝(C16H18ClN3S·3H2O):指示剂。 3.1.15 甲基红(C15H15N3O2):指示剂。 3.1.16 葡萄糖(C6H12O6)。 3.2 试剂配制 3.2.1 甲基红指示液(2g/L):称取甲基红0.20g,用少量乙醇溶解后,加水定容至100mL。GB5009.9—2016 2 3.2.2 盐酸溶液(1+1):量取50mL盐酸与50mL水混合。 3.2.3 氢氧化钠溶液(200g/L):称取20g氢氧化钠,加水溶解并定容至100mL。 3.2.4 碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜及0.050g亚甲蓝,溶于水中并定容至1000mL。 3.2.5 碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完 全溶解后,用水定容至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 3.2.6 淀粉酶溶液(5g/L):称取高峰氏淀粉酶0.5g,加100mL水溶解,临用时配制;也可加入数滴甲 苯或三氯甲烷防止长霉,置于4℃冰箱中。 3.2.7 碘溶液:称取3.6g碘化钾溶于20mL水中,加入1.3g碘,溶解后加水定容至100mL。 3.2.8 乙醇溶液(85%,体积比):取85mL无水乙醇,加水定容至100mL混匀。也可用95%乙醇 配制。 3.3 标准品 D-无水葡萄糖(C6H12O6)纯度:≥98%(HPLC)。 3.4 标准溶液配制 葡萄糖标准溶液:准确称取1g(精确到0.0001g)经过98℃~100℃干燥2h的D-无水葡萄糖,加 水溶解后加入5mL盐酸,并以水定容至1000mL。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。 4 仪器和设备 4.1 天平:感量为1mg和0.1mg。 4.2 恒温水浴锅:可加热至100℃。 4.3 组织捣碎机。 4.4 电炉。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 易于粉碎的试样 将样品磨碎过0.425mm筛(相当于40目),称取2g~5g(精确到0.001g),置于放有折叠慢速滤 纸的漏斗内,先用50mL石油醚或乙醚分5次洗除脂肪,再用约100mL乙醇(85%,体积比)分次充分 洗去可溶性糖类。根据样品的实际情况,可适当增加洗涤液的用量和洗涤次数,以保证干扰检测的可溶 性糖类物质洗涤完全。滤干乙醇,将残留物移入250mL烧杯内,并用50mL水洗净滤纸,洗液并入烧 杯内,将烧杯置沸水浴上加热15min,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20mL淀粉酶溶液,在55℃~ 60℃保温1h,并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不显现蓝色。若显蓝色,再加热糊化并 加20mL淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘溶液不显蓝色为止。加热至沸,冷后移入250mL容量瓶中, 并加水至刻度,混匀,过滤,并弃去初滤液。 取50.00mL滤液,置于250mL锥形瓶中,加5mL盐酸(1+1),装上回流冷凝器,在沸水浴中回流 1h,冷后加2滴甲基红指示液,用氢氧化钠溶液(200g/L)中和至中性,溶液转入100mL容量瓶中,洗 涤锥形瓶,洗液并入100mL容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。 5.1.2 其他样品 称取一定量样品,准确加入适量水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净晾干取可食部