中华人民共和国国家标准 GB5009.97—2016 食品安全国家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.97—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.97—2003《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》。 本标准与GB/T5009.97—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定”; ———气相色谱法改为使用毛细管柱进行分析; ———优化了样品处理、衍生化和测定的条件; ———增加液相色谱法; ———增加液相色谱-质谱/质谱法; ———删除GB/T5009.97—2003《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》中的第二法比色法和第三法薄 层色谱法。GB5009.97—2016 1 食品安全国家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定 1 范围 本标准规定了食品中环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)的三种测定方法———气相色谱法、液相色谱法和 液相色谱-质谱/质谱法。 本标准气相色谱法适用于饮料类、蜜饯凉果、果丹类、话化类、带壳及脱壳熟制坚果与籽类、水果罐 头、果酱、糕点、面包、饼干、冷冻饮品、果冻、复合调味料、腌渍的蔬菜、腐乳食品中环己基氨基磺酸钠的 测定。 本标准气相色谱法不适用于白酒中该化合物的测定。 本标准液相色谱法适用于饮料类、蜜饯凉果、果丹类、话化类、带壳及脱壳熟制坚果与籽类、配制酒、 水果罐头、果酱、糕点、面包、饼干、冷冻饮品、果冻、复合调味料、腌渍的蔬菜、腐乳食品中环己基氨基磺 酸钠的测定。 本标准液相色谱-质谱/质谱法适用于白酒、葡萄酒、黄酒、料酒中环己基氨基磺酸钠的测定。 第一法 气相色谱法 2 原理 食品中的环己基氨基磺酸钠用水提取,在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应,生成环己醇 亚硝酸酯,利用气相色谱氢火焰离子化检测器进行分离及分析,保留时间定性,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。 3.1 试剂 3.1.1 正庚烷[CH3(CH2)5CH3]。 3.1.2 氯化钠(NaCl)。 3.1.3 石油醚:沸程为30℃~60℃。 3.1.4 氢氧化钠(NaOH)。 3.1.5 硫酸(H2SO4)。 3.1.6 亚铁氰化钾{K4[Fe(CN)6]·3H2O}。 3.1.7 硫酸锌(ZnSO4·7H2O)。 3.1.8 亚硝酸钠(NaNO2)。 3.2 试剂配制 3.2.1 氢氧化钠溶液(40g/L):称取20g氢氧化钠,溶于水并稀释至500mL,混匀。GB5009.97—2016 2 3.2.2 硫酸溶液(200g/L):量取54mL硫酸小心缓缓加入400mL水中,后加水至500mL,混匀。 3.2.3 亚铁氰化钾溶液(150g/L):称取折合15g亚铁氰化钾(3.1.6),溶于水稀释至100mL,混匀。 3.2.4 硫酸锌溶液(300g/L):称取折合30g硫酸锌的试剂(3.1.7),溶于水并稀释至100mL,混匀。 3.2.5 亚硝酸钠溶液(50g/L):称取25g亚硝酸钠,溶于水并稀释至500mL,混匀。 3.3 标准品 环己基氨基磺酸钠标准品(C6H12NSO3Na):纯度≥99%。 3.4 标准溶液的配制 3.4.1 环己基氨基磺酸标准储备液(5.00mg/mL):精确称取0.5612g环己基氨基磺酸钠标准品,用水 溶解并定容至100mL,混匀,此溶液1.00mL相当于环己基氨基磺酸5.00mg(环己基氨基磺酸钠与环 己基氨基磺酸的换算系数为0.8909)。置于1℃~4℃冰箱保存,可保存12个月。 3.4.2 环己基氨基磺酸标准使用液(1.00mg/mL):准确移取20.0mL环己基氨基磺酸标准储备液用 水稀释并定容至100mL,混匀。置于1℃~4℃冰箱保存,可保存6个月。 4 仪器与设备 4.1 气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)。 4.2 涡旋混合器。 4.3 离心机:转速≥4000r/min。 4.4 超声波振荡器。 4.5 样品粉碎机。 4.6 10μL微量注射器。 4.7 恒温水浴锅。 4.8 天平:感量1mg、0.1mg。 5 分析步骤 5.1 试样溶液的制备 5.1.1 液体试样处理 5.1.1.1 普通液体试样摇匀后称取25.0g试样(如需要可过滤),用水定容至50mL备用。 5.1.1.2 含二氧化碳的试样:称取25.0g试样于烧杯中,60℃水浴加热30min以除二氧化碳,放冷,用 水定容至50mL备用。 5.1.1.3 含酒精的试样:称取25.0g试样于烧杯中,用氢氧化钠溶液(3.2.1)调至弱碱性pH7~8,60℃ 水浴加热30min以除酒精,放冷,用水定容至50mL备用。 5.1.2 固体、半固体试样处理 5.1.2.1 低脂、低蛋白样品(果酱、果冻、水果罐头、果丹类、蜜饯凉果、浓缩果汁、面包、糕点、饼干、复合 调味料、带壳熟制坚果和籽类、腌渍的蔬菜等):称取打碎、混匀的样品3.00g~5.00g于50mL离心管 中,加30mL水,振摇,超声提取20min,混匀,离心(3000r/min)10min,过滤,用水分次洗涤残渣,收 集滤液并定容至50mL,混匀备用。 5.1.2.2 高蛋白样品(酸乳、雪糕、冰淇淋等奶制品及豆制品、腐乳等):冰棒、雪糕、冰淇淋等分别放置于