ICS  65.020.20 B 38 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 2820—2017 中草药中 330 种农药残留量的测定 液相色谱四极杆飞行时间串联质谱法 Determination of 330 pesticides residues in traditional chinese medicines LC-QTOF method 文稿版次选择 2017 - 03 - 30 发布 安徽省质量技术监督局 2017 - 04 - 30 实施 发 布 DB34/T 2820—2017 前    言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省检验检疫科学技术研究院提出。 本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省检验检疫科学技术研究院、阜阳市食品药品检验中心。 本标准主要起草人：韩芳、宋伟、吕亚宁、伊芳、丁磊、周典兵、胡艳云、郑平、盛旋。 I DB34/T 2820—2017 中草药中 330 种农药残留量的测定 液相色谱四极杆飞行时间串联质谱法 1 范围 本标准规定了中草药中 330 种农药残留量的液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法。 本标准适用于人参、枸杞、川芎、菊花和枇杷叶中 330 种农药残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 样品中多种农药经乙腈提取，采用快速样品前处理技术 QuEChERS 方法净化，液相色谱四级杆飞行 时间串联质谱法测定，标准加入法定量。 4 试剂和材料 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 4.10 4.11 4.12 4.13 4.14 4.15 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 乙腈：色谱纯。 丙酮：色谱纯。 甲酸：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 乙酸铵：分析纯。 氯化钠：分析纯。 无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯。 石墨化炭黑（GCB）。 十八烷基硅烷 (ODS) 键合相吸附剂（C18）：粒径 40 µm ～60 µm。 柠檬酸钠：分析纯。 柠檬酸二钠倍半水合物：分析纯。 基质分散固相萃取剂：900 mg MgSO4、150 mg N-丙基乙二胺（PSA）和 120 mg 石墨化炭黑（GCB）。 农药标准物质：纯度≥95％，参见附录 A。 标准储备溶液 ——分别称取适量（精确至 0.1 mg）各种农药化学污染物标准物分别于 10 mL 容量瓶中，根据标 准物的溶解性选择甲醇、乙腈、丙酮等溶剂溶解并定容至刻度，标准储备溶液避光 0-4℃保存， 可使用一年。 1 DB34/T 2820—2017 4.16 混合标准溶液（混合标准溶液 A、B、C、D 和 E） ——按照农药的性质和保留时间，将 330 种农药化学污染物分成五组。本标准对 330 种农药化学污 染物的分组及其混合标准溶液浓度参见附录 A。 ——根据每种农药的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个农药标准 储备溶液于 100 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光 0-4℃保存，可使用一 个月。 5 仪器和设备 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 5.7 5.8 6 液相色谱-四级杆飞行时间质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。 色谱柱： C18,3.5 m,100 mm×2.1 mm。 分析天平：感量 0.1 mg 和 0.01 g。 匀浆机：转速不低于 20000 r/min。 离心机：转速不低于 4500 r/min。 氮吹浓缩仪。 涡旋混合器。 水平振荡器。 试样制备与保存 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 6.1 试样制备 从原始样品中取出有代表性样品约 500 g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装入洁 净容器作为试样，密封，并标明标记。 6.2 试样保存 将试样置于 -18℃以下冷冻避光保存。 7 分析步骤 称取 10 g（精确至 0.01 g）样品于 50 mL 离心管中，先加入 10 mL 水，静置 30 min，涡旋振 荡后加入 10 mL 乙腈，13500 r/min 均质提取 1 min，加入 4.0 g MgSO4、1.0 g NaCl、1.0 g 柠檬 酸钠、0.5 g 柠檬酸二钠倍半水合物，涡旋 1 min 后，8000 r/min 离心 5 min，吸取 5 mL 上清液于 含有 900 mg MgSO4、150 mg N-丙基乙二胺（PSA）和 120 mg 石墨化炭黑（GCB）的净化管中，涡旋 1 min 后静置，4000 r/min 离心 5 min，取上清于另一干净试管中，在 40℃水浴中氮气吹干，用 1 mL 乙 腈+0.1％甲酸水（2+8，v/v）定容液溶解，过 0.22 μm 滤膜，滤液供仪器测定。 8 测定 8.1 色谱条件 液相色谱条件参考如下： 2 DB34/T 2820—2017 a) b) c) d) e) 色谱柱：SB-C18, 3.5 m, 100 mm×2.1 mm 或相当者； 流动相：A 为 0.1％甲酸水（含 0.5 mmol 的乙酸铵），B 为乙腈； 柱温：40℃； 进样量：10 µL； 流动相梯度洗脱条件见表 1。 表1 8.2 流动相梯度洗脱条件 时间 流速 A B （min） （µL/min） ％ ％ 0 400 99 1 3.0 400 70 30 6.0 400 60 40 15.0 400 40 60 19.0 400 10 90 23.0 400 10 90 23.01 400 99 1 27.0 400 99 1 质谱条件 质谱参考条件如下： a) 电喷雾电离正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI-）； b) 毛细管电压：4.0 kV； c) 干燥气温度：325℃； d) 干燥气流量：10 L/min； e) 鞘流气温度：325℃； f) 鞘流气流速：11 L/min； g) 雾化气压力：40 psi； h) 锥孔电压：60 V； i) 碎裂电压：140 V。 8.3 定性测定 以各化合物标准溶液进行质谱扫描获得 330 种目标化合物的特征碎片离子和、保留时间等信息， 计算各化合物的精确质量数，建立基于精确质量数、保留时间和质谱图信息的筛查列表，同时设置质量 数偏差、保留时间偏差范围等判定标准，建立 330 种农药精确质量数据库。通过分子离子的精确质量 偏差、同位素分布、同位素比例和保留时间对农药残留进行定性测定。 8.4 定量测定 按照液相色谱四级杆飞行时间串联质谱条件测定样品和基质标准工作溶液。基质标准工作液和待测 液中检测农药的响应值应在仪器线性响应范围内。若响应值超出线性范围，应用空白基质样液将其稀释 至线性范围内进行定量测定。测定结果按公式（1）计算样品中待测物的含量。 8.5 空白试验 3 DB34/T 2820—2017 除不加试样外，按上述分析步骤进行。 9 结果计算和表述 按公式（1）计算试样中农药残留的含量，计算结果需扣除空白值。 Ci  式中： Ci —— Cx —— Ax —— Ai —— C x  Ai ..................................... (1) Ax 试样溶液中待测物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 标准溶液中被测组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 标样的峰面积； 待测样品的出峰面积。 10 定量限、回收率 本标准中 330 种农药的定量限参见附录A；本标准的回收率数据参见附录B。 4 DB34/T 2820—2017 AA 附 录 A （资料性附录） 330 种农药标准物质信息 表A.1 330 种农药标准物质信息 精确 精确 保留时间 分 检出限 质量数 质量数 （min） 组 (μg/kg) 102-07-8 C13H12N2O 212.0950 7.11 A 3.0 Acetochlor 34256-82-1 C14H20ClNO2 269.1183 12.69 A 7.5 莎稗磷 Anilofos 64249-01-0 C13H19ClNO3PS2 367.0233 14.86 A 8.3 4 莠去通 Atratone 1610-17-9 C9H17N5O 211.1433 4.37 A 8.3 5 益棉磷 Azinphos-ethyl 2642-71-9 C12H16N3O3PS2 345.0371 13.35 A 3.0 6 嘧菌酯 Azoxystrobin 131860-33-8 C22H17N3O5 403.1168 11.26 A 3.1 7 麦锈灵 Benodanil 15310-01-7 C13H10INO 322.9807 8.45 A 6.9 8 地散磷 Bensulide 741-58-2 C14H24NO4PS3 397.0605 15.26 A 11.7 9 联苯三唑醇 Bitertanol 55179-31-2 C20H23N3O2 337.1790 12.82 A 12.0 10 溴苯烯磷 Bromfenvinfos 33399-00-7 C12H14BrCl2O4P 401.9190 14.18 A 12.7 11 丁酮威亚砜 34681-24-8 C7H14N2O3S 206.0725 2.17 A 10.0 12 仲丁灵 Butralin 33629-47-9 C14H21N3O4 295.1532 18.22 A 9.4 13 硫线磷 Cadusafos 95465-99-9 C10H23O2PS2 270.0877 14.75 A 5.9 14 甲萘威 Carbaryl 63-25-2 C12H11NO2 201.0790 6.33 A 10.5 15 双酰草胺 Carbetamide 16118-49-3 C12H16N2O3 236.1161 4.69 A 12.9