ICS 65.020.30 B 40 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB22/T 3022—2019 家畜尿液中β-兴奋剂免疫胶体金法检测 操作规程 Colloidal gold immune method testing technology operating procedures of β-stimulant in domestic animal urine 2019 - 05 - 27 发布 吉林省市场监督管理厅 2019 - 06 - 17 实施 发 布 DB22/T 3022—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位吉林省畜牧总站。 本标准主要起草人：计越、谢春雷、李秀菊、何宇浩、郭玮、王欣睿、任清丹、单世梁、侯丽娜。 I DB22/T 3022—2019 家畜尿液中β-兴奋剂免疫胶体金法检测操作规程 1 范围 本标准规定了家畜尿液中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇3种β-兴奋剂免疫胶体金法检测的术语 和定义、抽样要求、抽样方法、抽样记录、检测方法、疑似阳性样品处理、记录与档案管理。 本标准适用于家畜尿液中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇3种β-兴奋剂的检测。 2 术语和定义 下列术语和定义适用与本文件。 2.1 β-兴奋剂 β-stimulant 化学合成的儿茶酚胺类衍生物，具有苯乙醇胺结构母核，苯环上连接有碱性的β-羟胺侧链。 2.2 免疫胶体金法 immune Colloidal gold method 以胶体金作为示踪标志物，应用于抗原抗体的一种免疫标记技术。 3 抽样要求 3.1 原则 应按随机原则进行。 3.2 人员 3.2.1 抽样人员应为农业行政执法部门或受行政主管部门委托的专业技术人员，不少于 2 人，负责抽 样、现场快速检测、封装和记录。 3.2.2 抽样人员应遵守抽样程序，填写抽样单，至少应有 2 名抽样人员现场签字。 3.2.3 抽样人员应严格遵守生物安全操作的相关规定。 3.3 用品 护目镜、防护帽、防护服、防护靴、一次性手套、接尿杆、集尿杯、50 ml 采样瓶、抽样单、封条 等。 4 4.1 抽样方法 养殖和收购贩运环节 1 DB22/T 3022—2019 同一养殖场中养殖条件相同的猪、牛、羊为一检验批，用洁净的集尿杯，随机接取育肥后期猪、牛、 羊新鲜中段尿液（清晨饲喂前的尿液最佳），一个样品应来自同一家畜个体，每个样品不少于100 ml。 猪、羊尿液抽样数量见表 1，牛尿液抽样数量见表 2。 表1 猪、羊尿液抽样数量 存栏量（头/只） ≤500 501～1000 1001～5000 ＞5000 抽样数量（份） 3 5～7 7～10 10～15 表2 牛尿液抽样数量 存栏量（头） ≤50 51～100 101～500 ＞500 抽样数量（份） 3 3～5 5～8 8～12 4.2 屠宰环节 来源于同一养殖场、同一地区、同一时段屠宰的生猪、肉牛、肉羊为一检验批，随机抽取待宰猪（牛、 羊）尿样或者在屠宰线上采集膀胱尿样，取出尿液量不低于100 ml。抽样数量见表 3。 表3 屠宰环节抽样数量 屠宰数量（头） ≤100 101～500 501～-2000 ＞2000 抽样数量（份） 5 8 10 15 5 抽样记录 5.1 基本要求 抽样人员对样品进行编号，填写抽样单。被抽样单位应与抽样人员共同盖章（或签字），确认样品 的真实性。 5.2 5.2.1 5.2.2 样品编号 样品编号格式为 [地区代码]/[畜种代码]/[样品种类代码]/[取样日期]/[样品序号]。 地区代码见表 4，畜种代码见表 5，样品种类代码见表 6。 表4 地区 名称 地区 代码 2 地区代码 长春 吉林 四平 辽源 通化 白山 松原 白城 延边 CC JL SP LY TH BS SY BC YB 长白山 公主 梅河 管委会 岭 口 CBS GZL MHK DB22/T 3022—2019 表5 畜种代码 动物品种 猪 牛 羊 代码 P B O 表6 5.3 样品种类代码 样品种类 尿液 样品种类代码 U 样品序号 同一次取样过程中的序号，通常为 2 位，不足 2 位用“0”补齐。 示例：2017 年 1 月 1 日在长春市抽取的第 1 个猪尿样品，其编号为：CC/P/U/20170101/01。 5.4 其他要求 抽样单上的样品名称、样品编号、生产日期或批号、检疫证(耳标)编号、抽样数量、抽样基数、抽 样环节、受检单位和抽样单位等信息要清晰准确填写，要与实物样品一致，不得混淆。 6 检测方法 6.1 项目 每份样品同时检测克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇 3 种β-兴奋剂。 6.2 胶体金试纸条质量要求 6.2.1 宜选用农业农村部最临近年度“瘦肉精”免疫速测产品评价结果通报文件中的试纸条。 6.2.2 假阳性率应不高于 5%，假阴性率为零。 6.2.3 检测限应符合或优于下列参数，克伦特罗和莱克多巴胺不高于 3 μg/L，沙丁胺醇不高于 5 μg/L。 6.3 步骤 6.3.1 检测前将试纸条和待检尿样恢复至 15 ℃～25 ℃。 6.3.2 用吸管垂直滴加 2 滴〜3 滴无气泡的待检尿样（约 60μL）于加样孔内。如果尿液浑浊或有杂质， 过滤或离心后取上清液检测。 6.3.3 加样 5 min 后立即判断结果。 6.4 结果判定 6.4.1 阴性 C 线、T 线均显色，表明不含β-兴奋剂或含量小于检测限。 3 DB22/T 3022—2019 6.4.2 疑似阳性 C 线显色，T 线不显色，表明β-兴奋剂含量大于检测限。 6.4.3 无效 C 线不显色，无论T线是否显色，该检测卡均判为无效。 7 疑似阳性样品处理 7.1 封存 将样品平均分成 3 份，分别装入洁净的采样瓶中，贴上封条。封条上由被检单位负责人和 2 名抽 样人分别签字，标明封样日期、抽样编号，并分别加盖抽样单位和被抽样单位公章，如果被抽样单位没 有公章，由单位负责人按手印。抽样单、封条、样品包装内容要一致，其中 2 份由抽样人员带回用于 检验和留样用，另外 1 份交由被抽检单位保存，作为对检验结果有争议时复检用。 7.2 保存和运输 样品应在 0 ℃～4 ℃ 的条件下，24 h 内送达检测机构。如不能及时送达，应在 -20 ℃的条件下 进行冷冻保存。样品在运输过程中应避免污染、变质、破损。 8 记录与档案管理 记录及时归档，保存 2 年。 _________________________________ 4