ICS 65.020 B 04 备案号：60790-2018 吉 林 DB22 省 地 方 标 准 DB 22/T 1586—2018 代替 DB22/T 1586-2012 农田土壤中甲基汞、乙基汞的测定 高效液 相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法 Determination of methyl- and ethyl-mercuries in farmland soil by HPLC-ICP-MS 2018 - 07 - 30 发布 吉林省质量技术监督局 2018 - 08 - 30 实施 发 布 DB22/T 1586—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 和 GB/T 20001.4-2015给出的规则起草。 本标准代替DB22/T 1586-2012《农田土壤中甲基汞、乙基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子 体质谱联用法》。与DB22/T 1586-2012相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： ——标准范围中增加了“定量限”内容； ——增加了“试验条件”一章； ——修改了“试剂和材料”部分内容； ——增加了“精密度”具体要求； ——增加了“质量保证和控制”一章； ——增加了“试验报告”一章。 本标准由吉林省农业委员会提出并归口。 本标准起草单位：吉林省农业科学院。 本标准主要起草人：孟繁磊、张振都、何智勇、蔡红梅、张之鑫、王莹、张国辉、张奇、杜晓晴、 蔡玉红、宋志峰、魏春雁。 本标准代替了DB22/T 1586-2012。 本标准历次版本发布情况为： ——DB22/T 1586-2012。 I DB22/T 1586—2018 农田土壤中甲基汞、乙基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子 体质谱联用法 警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。 1 范围 本标准规定了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法（HPLC-ICP-MS）测定农田土壤样品中甲 基汞、乙基汞含量的原理、试剂与材料、仪器与设备、样品、试验步骤、试验数据处理、精密度、检出 限、定量限和回收率、质量保证和控制、试验报告等内容。 本标准适用于农田土壤样品中甲基汞、乙基汞含量的测定。 本标准在称样量 5 g、提取液定容体积为 100 mL时，甲基汞和乙基汞检出限分别为0.004 mg/kg 和0.008 mg/kg，定量限分别为0.013 mg/kg和0.025 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定 NY/T 52 土壤水分测定法 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3 原理 样品用硝酸溶液提取，氨水溶液调pH，待测液经高效液相色谱将甲基汞、乙基汞分离，分离后的甲 基汞、乙基汞依次进入电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS），经过气动雾化器以气溶胶的形式进入氩气 为基质的高温射频等离子体中，使待测元素去除溶剂、原子化和离子化后，进入质谱质量分析器进行检 测。由于甲基汞、乙基汞元素的检测信号强度与其在样品中的浓度成正比，因此根据两种形态汞元素的 检测信号强度进行定量。 4 试验条件 实验室温度应控制在20 ℃±5 ℃范围内，相对湿度控制在20%～85%范围内。 5 试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯。 1 DB22/T 1586—2018 5.1 水，GB/T 6682，一级。 5.2 氯化甲基汞，CAS 115-09-3，纯度大于 98.5%。本品属Ⅰ级毒害品，试验过程中应采取适当的安 全和健康措施。 5.3 氯化乙基汞，CAS 107-27-7，纯度大于 98.0%。本品属Ⅰ级毒害品，试验过程中应采取适当的安 全和健康措施。 5.4 乙酸铵，CAS 631-61-8。 5.5 L-半胱氨酸盐酸盐，CAS 52-89-1。 5.6 硝酸，CAS 7697-37-2，优级纯，体积百分比为 38%。 5.7 氨水，CAS 1336-21-6，体积百分比为 28%～29%。 5.8 甲醇，CAS 67-56-1，色谱纯。 5.9 质谱调谐液，推荐选用含有钴（Co）、钇（Y）、铊（Tl）元素的质谱调谐液，调谐液浓度为仪器 生产商推荐浓度，介质为 2%硝酸。 5.10 硝酸溶液，取 33 mL 硝酸（5.6），用水稀释至 1000 mL。 5.11 氨水溶液，取 10 mL 氨水（5.7），用水稀释至 100 mL。 5.12 硝酸溶液，取 2 mL 硝酸（5.6），用水稀释至 100 mL。 5.13 甲基汞、乙基汞混合标准储备液，或使用有证标准物质，准确称取氯化甲基汞（5.2）、氯化乙 基汞（5.3）各 1 g(以甲基汞和乙基汞计)，精确至 0.1 mg，用硝酸溶液（5.12）溶解并定容至 1000 mL， 配制成 1000 mg/L 的甲基汞、乙基汞标准储备液，于 0 ℃ ～ 4 ℃冰箱中储存，有效期为 3 个月。 5.14 甲基汞、乙基汞混合标准中间液，吸取适当体积的氯化甲基汞、氯化乙基汞标准储备液（5.13）， 用水逐级稀释，配制成 10 mg/L 的标准中间液，于 0 ℃～4 ℃冰箱中储存，有效期为 1 个月。 5.15 甲基汞、乙基汞混合标准工作液，用移液管分别移取标准中间液（5.14）0 mL、0.010 mL、0.050 mL、0.50 mL、2.50 mL、5.0 mL 于 6 个 100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，现用现配。该溶液 各种形态汞浓度均为 0 µg/mL、0.001 µg/mL、0.005 µg/mL、0.05 µg/mL、0.25 µg/mL、0.50 µg/mL。 6 仪器设备 6.1 6.2 6.3 6.4 7 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱仪。 分析天平，感量 0.1 mg 和 1 mg。 离心机，转速不低于 4000 r/min。 超声波水浴。 样品 应按照NY/T 1121.1的规定制备样品，其含水量(W)应按NY/T 52的规定测定。 8 试验步骤 8.1 提取 称取样品5.000 g于离心管中，缓慢加入硝酸溶液（5.10）20 mL，边加边搅拌至不产生气泡为止， 超声波500 W提取1.0 h，4000 r/min离心5分钟，吸取上层澄清溶液5.00 mL于25 mL烧杯中，用氨水溶 液（5.11）调pH到7.5，转移至25 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，过0.45 µm滤膜，上机测定。 8.2 2 测定 DB22/T 1586—2018 8.2.1 仪器参考条件 应符合下列条件： a) 色谱柱：C18 柱，150 mm×4.6 mm×3.5 µm；或者性能相当的色谱柱。 b) 柱温：25 ℃。 c) 流动相：5 mmol/L 乙酸铵、3.8 mmol/L L-半胱氨酸盐酸盐-甲醇（95+5，V+V）溶液，先加适 量氨水（5.6），再用氨水溶液（5.10）调 pH 值至 7.5。流动相现用现配，使用时间不超过 24 h。 d) 流动相流速：1.0 mL/min。 e) 进样体积：100 µL。 按照上述色谱条件进行分离测定，标准品总离子流色谱图见附录 A。 在无碰撞气模式下，使用质谱调谐液（5.8）对仪器工作状态进行优化，调谐参数见表1。 表1 参 电感耦合等离子体质谱仪调谐参数 数 设定值 RF功率 1300 W～1500 W 采样深度 6 mm～9 mm 载气流速 6 L/min～10 L/min 补充气流速 0.4 L/min～0.6 L/min 蠕动泵转速 0.3 r/min 循环水温度 2 ℃ 注：本工作参数设定值为参考值，实际工作中应根据不同仪器、色谱柱等进行调整 优化后的状态指标见表2。 表2 参 电感耦合等离子体质谱仪调谐指标 数 测定值 Co(59) 质量轴 ±0.1 amu Y(89) Tl(205) 质量分辨率（10%） 0.65 amu～0.8 amu 灵敏度 Y(89) ≥10 000 （0.1sec.,1ng/mL） Tl(205) ≥10 000 氧化物（CeO/Ce） 2+ 双电荷（Ce /Ce） ≤1.5% ≤3.0% 注：本参数要求值为参考值，实际工作中根据不同仪器的性能进行调整。 8.2.2 定性方法 202 甲基汞、乙基汞均以 Hg为检测质量数，试样与标准品中甲基汞、乙基汞色谱峰保留时间的相对偏 差不大于5%，即可判定试样中存在甲基汞、乙基汞。 8.2.3 定量方法 3 DB22/T 1586—2018 将甲基汞、乙基汞混合标准工作液（5.14）按照8.2.1的仪器条件进行分析，以浓度为横坐标，峰 面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量，保证甲基汞、乙基汞的响应值应 在测定线性范围内。 9 试验数据处理 试样中甲基汞、乙基汞含量按式（1）进行计算。 X  C  V  1000  n .................................. (1) m  100  W  式中： X ——试样中甲基汞、乙基汞含量（mg/kg）； C ——标准曲线上查得的甲基汞、乙基汞的浓度（µg/mL）； V ——浸提液的体积（mL）； m ——样品的质量（g）； W ——样品含水量（%）； n ——稀释倍数。 平行测定结果用算术平均值表示，数值修约应按照GB/T 8170执行，保留两位有效数字。 10 精密度 10.1 重复性要求 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应≤10%。 10.2 再现性要求 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应≤15%。 11 质量保证和控制 11.1 空白试验 以 20 个样品为 1 个批次，应做 1 个空白实验，测定结果中总汞的含量不应超过方法检出限。 11.2 校准 标准曲线应至少包含 5 个非零浓度点， 相关系数 r ≥ 0.995。每次开机后，按照与标准曲线建 立相同的仪器条件，测定标准曲线浓度范围内的 1 个有证标准样品的汞含量，测量值应在证书标准值 范围内。否则，应重新建立标准曲线。 11.3 平行测定 每 20 个样品或每批次（少于 20 个样